No image available
No image available
V uvodnem delu naloge smo predstavili osnovne značilnosti karnitina, bolezni, ki so povezne s pomanjkanjem karnitina, in možno terapijo s karnitinom. Pri eksperimentalnem delu smo preizkusili analizni postopek encimske ultravijolične (UV)metode za določanje L-karnitina v krvnem serumu. Metoda je zasnovana na petih zaporednih encimskih reakcijah. Koencim A (CoA), ki nastane v reakciji acetil-Co-A z L-karnitinom pod vplivom karnitin acetiltransferaze, se porabi v aktivaciji acetata z adenozin-5'-trifosfatom (ATP). Nastali adenozin -5'-monofosfat (AMP) se pretvori z miokinazo v dvojno količino adenozin -5'-difosfata (ADP), ki reagira s fosfoenolpiruvatom do piruvata. Končno se piruvat z reduciranim nikotinamid-adenindinukleidom (NADH) reducira v laktat. Količina (molarna) porabljenega NADH je enaka polovični količini prostega L-karnitina, ki je prisoten v vzorcu. Absorbanco porabljenega NADH smo merili v UV-področju pri 340 nm. Ponovljivost metode v seriji in med serijami je zadovoljiva. Pri ponovljivosti v seriji je koeficient variabilnosti 4,23%. Koeficient variabilnosti pri ponovljivosti medserijami je 6,28%. Povprečna koncentracija L-karnitina v serumu žensk je 39,77 plus, minus 5,18 [mikro]mol/l(razpon: 32,14-47,72 [mikro]mol). Pri moških je povprečna koncentracija L-karnitina v serumu 52,00 plus, minus 8,05 [mikro]mol/l (razpon: 39,99-68,03 [mikro]mol/l).Povprečna koncentracija L-karnitina v serumu žensk se signifikantno razlikuje od povprečne koncentracije L-karnitina v serumu moških [t-tesdt, t[spodaj]izr=4,83; verjetnost pomote p([verticalt[vertical>4,558)= 0,0001]. Pri ženskah obstaja pri stopnji tveganja 1% signifikantna povezava med koncentracijo L-karnitina v serumu in starostjo; pri moških signifikantne povezave nismo ugotovili. Analizni postopek encimske UV-metode je enostaven in hiter.
No image available