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· 2015
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· 1995
O presente estudo objetiva avaliar, comparativamente, as tecnicas fotocolorimetrica e fluorimetrica, na determinacao da taxa de hidroxiprolina encontrada em hidrolisados proteicos a partir de amostras teciduais nao cicatriciais. A tecnica fotocolorimetrica utilizada foi a proposta por IBBOTT (1974). A tecnica fluorimetrica adotada foi descrita por Felix, Toome e DeBernardo (1975) e adaptada para as condicoes do Laboratorio do Instituto de Tecnologia do Parana. O procedimento experimental constou da retirada e armazenamento de fragmentos teciduais de duodeno, jejuno e colo descendente de dois caes. As amostras teciduais foram pesadas e a metade delas submetida a desidratacao em estufa a 80[vbar]C. Em seguida, as amostras teciduais hidratadas e desidratadas foram submetidas a hidrolise acida, sendo que em seguida, os hidrolisados teciduais foram processadas bioquimicamente para a determinacao da taxa de hidroxiprolina tecidual conforme duas tecnicas distintas: a primeira, fotocolorimetrica (utilizando o reativo de Ehrlich e analise em leitor de microplacas) e a segunda, fluorimetrica (mediante descarboxilacao oxidativa com N-clorosuccianamida e uso de fluorescamina em cromatografia liquida de alta pressao). A analise dos resultados obtidos a partir das solucoes-padrao de trabalho de hidroxiprolina apresentou a correlacao r=0,9970 na tecnica fotocolorimetrica e r=0,9962 na tecnica fluorimetrica. A taxa de hidroxiprolina media encontrada na tecnica fotocolorimetrica foi de 3,303 mg/g de tecido para as amostras hidratadas e de 12,193mg/g de tecido para as amostras desidratadas; na tecnica fluorimetrica, estas taxas foram de 4,217 mg/g de tecido e 12,018 mg/g de tecido, respectivamente. Nas amostras processadas como pool pela tecnica fotocolorimetrica, a taxa de hidroxiprolina tecidual foi de 3,889mg/g de tecido nas amostras hidratadas e de 12,500 mg/g de tecido nas amostras desidratadas; na tecnica fluorimetrica estes resultados formam 2,622mg/g de tecido e 13,500 mg/g de tecido, respectivamente. Nao houve diferenca significante entre estes resultados. Ambas as tecnicas apresentaram tempo de processamento em laboratorio semelhante(AU).