BP180 (type XVII collagen, Col17) is a main target antigen in the two subepidermal blistering diseases bullous pemphigoid (BP) and mucous membrane pemphigoid (MMP). The NC16A domain is targeted in 80-90% of BP and 50% of MMP sera and is applied in highly sensitive and specific widely available ELISA systems. Additionally, epitopes on the BP180 ectodomain outside NC16A have been reported. So far, for a considerable number of BP and MMP patients, no standardized assay is available for the detection of non-NC16A anti-BP180-specific autoantibodies. Here, four overlapping His-tagged proteins covering the BP180 ectodomain (F1, amino acids (aa) 563-807, F2, aa793-1039, F3, aa1024-1270, F4, aa1255-1497) outside the NC16A domain were cloned, expressed, purified and analyzed for their reactivity with patient sera by immunoblotting (IB). Only NC16A-unreactive BP (n=50) and MMP (n=30) sera with reactivity to the cell-derived soluble ectodomain of BP180 (LAD-1) were included. As controls, sera of healthy blood donors (n= 50) were used. 98% of BP and 77% of MMP sera exhibited autoantibodies against F3 (specificity 98%), followed by reactivity with F4 (70% of BP and 63% of MMP sera, 89% specificity), F2 (42% of BP and 53% of MMP sera, 89% specificity) and F1 (20% of BP and 13% of MMP, 91% specificity). Additionally, autoantibody reactivity with recombinant full-length (FL) BP180 and the BP180 ectodomain (BP180ec, including NC16A) was analyzed. 100% of BP and 73% of MMP sera reacted with FL BP180, whereas 98% of BP and 87% of MMP sera showed reactivity with BP180ec (94% specificity for both tests). In this study, a 246 aa stretch in the C-terminal part of BP180 was identified, that may be applied for the development of a widely used test system for the detection of non-NC16A-reactive anti-BP180 antibodies. This assay will close a considerable gap in the serological diagnosis of BP and MMP.

Abstract: Das Schleimhautpemphigoid (SHP) ist eine Pemphigoid-Erkrankung, die sich überwiegend an der Schleimhaut manifestiert. Betroffen sind vor allem die Schleimhäute von Mund, Augen, Nase und Pharynx, aber auch von Larynx, Trachea, Ösophagus sowie die Genital- und Perianal-Region. Die Ausprägung der Erkrankung ist variabel und reicht von gingivalem Erythem und einzelnen oralen Läsionen bis zu schwerwiegenden trachealen Strikturen, die die Atmung behindern sowie konjunktivaler Vernarbung mit deutlichen Visuseinschränkungen und, nicht selten, Erblindung. Die Diagnose beruht neben dem klinisch vorherrschenden Schleimhautbefall auf der direkten Immunfluoreszenz eines nichtläsionalen Biopsats und der Serologie. Das hauptsächliche Zielantigen ist BP180 (Kollagen XVII) und Reaktivität mit Laminin 332 ist in circa 25 % der SHP-Patienten mit einem Malignom assoziiert. Die Behandlung des SHP ist eine Herausforderung. Einerseits ist durch den Befall verschiedener Schleimhäute eine gute interdisziplinäre Zusammenarbeit der verschiedenen Fachdisziplinen gefordert, andererseits stehen auf Grund der Seltenheit der Erkrankung keine randomisierten kontrollierten klinischen Studien zur Verfügung. Ziel der Leitlinie ist es, das klinische Bild einschließlich Schweregrade und Scoring-Systeme darzustellen sowie Anleitung zu geben für die Diagnosestellung und Therapie dieser komplexen Erkrankung. Beim SHP spielt die interdisziplinäre Zusammenarbeit eine wesentliche Rolle sowie die möglichst zeitnahe Diagnosestellung und Einleitung einer adäquaten Therapie, um irreversible Schäden der Schleimhäute mit schwerwiegenden Komplikationen zu vermeiden